Ядерний матрикс: фосфоліпіди.

Перша спроба вивчити структурну роль фосфоліпідів була зроблена в роботі [Сосса L. et al., 1980].
З цією метою ядерний матрикс печінки щурів, який містив фосфатидилхолін і сфінгоміелін, обробляли фосфолипазой С (вільної від протеаз, але містить сфінгоміеліназу), що призводило до вивільнення майже всієї ДНК і РНК, повністю гідролізовані фосфоліпіди, але залишало нейтральні ліпіди (їх склад не наводиться ). Автори роблять висновок, що фосфоліпіди ядерного матриксу відіграють важливу роль у міцному зв’язку нуклеїнових кислот з матриксом або безпосередньо, або через зв’язок з негістоновимі білками матриксу. Пізніше було показано [Сосса L. et al., 1987], що переварювання фосфолипазой З ядерного матриксу печінки щурів призводило до вивільнення майже всієї (80%) реплікативної ДНК, розміром 200 тис. пар нуклеотидів. Це підтверджує, що місця реплікації ДНК локалізовані на матриксі і припускає, що специфічні матріксовие зв’язки (ДНК-негістоновие білки-фосфоліпіди) можуть відігравати роль у тривимірній конфігурації ДНК всередині ядра.
Склад фосфоліпідів ядерного матриксу печінки щурів і декількох ракових клітин досить добре вивчений (табл. 3), чого не можна сказати, на жаль, про нейтральні ліпідах. Перш за все слід підкреслити, що склад фосфоліпідів ядерного матриксу відрізняється від складу фосфоліпідів ядра і фосфоліпідів хроматину [Казначеєв Ю.C. et al., 1984, Алесенко А.В. et al., 1989, Геворкян Е.С. et al., 1985, Казначеєв Ю.С. et al., 1985, Алесенко А.В. et al., 1983, Кулагіна Т.П., 1990, Кулагіна Т.П., 1997, Balint ZS, 1987], де домінує фосфатидилхолін . У ядерному матриксі печінки щурів домінуючим є сфінгоміелін (40-50%). Однак у випадку ракових клітин він стає мінорним компонентом (2-3%), а домінуючими – фосфатидилхолін і фосфатидилетаноламін. У всіх препаратах ядерного матриксу незалежно від об’єкта і методу виділення завжди присутня кардіоліпіну, причому в ракових клітинах в значно більших кількостях, ніж в печінці.
Показано [Стручков В.А., Стражевская Н.Б., 1993], що лужний фенол видаляє сфінгоміелін з матриксу майже повністю, причому вибірково по відношенню до інших фосфоліпідів. Знайдено [Алесенко А.В. et al., 1983], що сфінгоміеліназа (чиста від протеаз і ДНКази) видаляє з матриксу печінки щурів 90% сфінгоміеліна і 80% новосинтезованих ДНК, але при цьому не змінює якісний склад білків. З цих фактів випливає, що ДНК в матриксі може бути пов’язана безпосередньо через сфінгоміелін, а не через негістоновие білки (НГБ), як передбачалося [Сосса L. et al., 1980], причому досить слабо.
У період синтезу ДНК зміст сфінгоміеліна збільшується в 1,5 рази [Алесенко А.В. et al., 1983], а в умовах інгібування синтезу ДНК і білка, навпаки, різко падає в 3 рази [Геворкян Е.С. et al., 1987]. Важливо відзначити, що в разі активації синтезу ДНК   на тлі збільшення сфінгоміеліна спостерігається, як правило, зменшення вмісту фосфатидилхоліну. Різноспрямованість змін цих двох фосфоліпідів, спостережувану також і в хроматині [Геворкян Е.С. et al., 1985], можна пояснити посиленням процесу переносу фосфорілхоліном з молекули фосфатидилхоліну для синтезу сфінгоміеліна. Виявлення підвищеного вмісту сфінгоміеліна в фосфоліпідах ядерного матриксу [Алесенко А.В. et al., 1983] і особливо в ядерному білковому матриксі печінки щурів [Алесенко А.В. et al., 1982] підтверджує участь сфінгоміеліна в точках ініціації реплікації ДНК на матриксі, тим більше, що сфінгоміелін надає сильний дестабілізуючий ефект на вторинну структуру ДНК порівняно з іншими фосфоліпідами [Manzoli F.А. et al., 1972].

Comments are closed.