ROR / RZR рецептори: фізіологія.

Виявлення RORE в промотор генів, кодіруюшіх білки з самими різними функціями (табл 1 mel), диференціальної експресії різних членів підродини та її регуляції, а також регульованості активності ROR / RZR лігандами дозволяє думати, що регуляторна активність цих рецепторів охоплює широкий спектр фізіологічних процесів. Найбільш вивченим і доведеним є участь ROR / RZR в регуляції імунних процесів, диференціювання центральної нервової системи і, можливо, модуляції ліпідного обміну. Показано, що експресія RORгамма-t захищає гібридомної Т-клітини від загибелі при їх активації за рахунок гальмування утворення ліганда Fas і інтерлейкіну-2, що передбачає участь RORгамма-t в імунній відповіді [He, ea 1998]. Експресія цієї ізоформи рецептора збільшується в тимоцитах до їх активації через кластер генів TCR-Jaльфа, в регуляторній сфері якого (TEA) виявлений RORE. Передбачається, що RORгамма-t бере участь у каскаді подій, що ведуть до дозріванню алфа / бета Т-клітин, на етапі, що забезпечує доступність ДНК локусу TCR-Ja [Villey, ea 1999].

Участь у регуляції імунної відповіді RORaльфаl і RZRaльфа передбачається на підставі гальмування цими рецепторами експресії в В-лімфоцитах 5-ліпоксигенази – одного з ключових ферментів біосинтезу прозапальних лейкотрієнів [Steinhilber, ea 1995]. На відміну від Т-клітин в одноядерних клітинах периферичної крові людини і культурах моноцитів агоністи RORaльфа ряду тіазолідиндіонів надають стимулюючий ефект на освіту інтерлейкіну-2 та інтерлейкіну-6. У цих клітинах мелатонін специфічно зв’язується як з плазматичними мембранами, так і з ядрами. Агоністи RORaльфа зв’язуються тільки з ядрами, а агоніст мембранних рецепторів мелатоніну S 20098 – тільки з мембранами. Істотно, що в дії тіазолідиндіонів і S 20098 спостерігався синергізм, що припускає подвійний шлях впливу мелатоніну на імунну систему [Garcia-Maurino, ea 1998]. (Цікаво відзначити, що синергізм між ядерними і мембранними рецепторами мелатоніну спостерігається і в одноклітинних організмів [Tsim, ea 1996].)

При мутаціях гена RORaльфа, що ведуть до утворення укороченою з С-кінця форми рецептора (лінія “хитаються” мишей (staggerer)) або форми мРНК з делеції ДНК-зв’язуючого домену (білок при цьому не експресується зовсім), у тварин виявлено низку нейрологических та інших відхилень, що виявляються в треморе, порушенні підтримки рівноваги, малому розмірі тіла. Мозочок таких тварин (в якому в нормі експресуються дві ізоформи RORaльфа, RORaльфаl і RORaльфа4/RZRaльфа [Matysiak-Scholze, ea 1997]) недорозвинений, клітини Пуркіньє нечисленні [Dussault, I., ea 1998] та їх електрофізіологічні характеристики суттєво відрізняються від норми [ Steinmayr, ea 1998]. У гетерозигот спостерігається часткова дегенерація клітин Пуркіньє, але це відбувається вже в зрілому віці, а темпи дегенерації вище у самців [Doulazmi, ea 1999]. Дегенеративні процеси в мозочку пов’язують з посиленою локальної експресією прозапальних цитокінів [Vernet-der ea 1998]. У гомозигот staggerer відзначений також ряд морфофункціональних порушень у нюхових цибулинах [Monnier, ea 1999]. Ці дані однозначно доводять участь RORaльфа в регуляції розвитку центральної нервової системи.

На підставі результатів експериментів з придушенням функцій щитовидної залози пропілтіоурацилом і замісною терапією тироксином, що показали, що тиреоїдні гормони визначають час, але не кінцевий рівень експресії RORaльфа (як і низки інших маркерів розвитку [Oppenheimer, ea 1994, Koibuchi, ea 2000]), і подібності ряду нейрологических симптомів, характерних для мутації staggerer (див. вище) і перинатального гіпотиреозу, висловлюється припущення, що RORaльфа може служити одним з посередників у дії тиреоїдних гормонів на мозок, що розвивається [Koibuchi, ea 1998]. Цієї концепції відповідають і дані про стимулюючу дію RORaльфа на транскрипцію маркера клітин Пуркіньє РСР-2 [Matsui, ea 1997], час експресії якого залежить від тиреоїдних гормонів. Експресія RORбета в попередниках клітин сітківки (мають нейронального походження) різко знижена при нульовій мутації гена ChxI0, що викликає затримку розвитку ока, а трансфекція RORбета в клітини-попередники значно прискорює їх проліферацію, що свідчить про участь RORбета у розвитку ока [Chow, ea 1998] . Прямий доказ цього твердження отримано шляхом нокауту гена RORбета. У RORбета-/ – мишей спостерігалася постнатальна дегенерація сітківки, ведуча до сліпоти дорослих тварин. походки [ Andre, ea 1998 ].”>Крім цього у таких тварин відзначені порушення циркадного поведінки і поява розгойдується <качиної> ходи [Andre, ea 1998]. Останні дані підтверджують припущення про значення RZRбета для структур, що беруть участь в обробці сенсорної інформації. Використання генетичної моделі staggerеr мишей з делеції в гені RORaльфа [Hamilton, ea 1996] представляється досить перспективним для вивчення ролі цього рецептора в дифференцировке не тільки мозку, але і багатьох інших структур і функцій.

Так, показано, що експресія аполіпопротеїну А-1 в тонкому кишечнику у гомозиготних за даною мутації тварин була значно знижена, що свідчить про участь RORaльфа в регуляції аполіпопротеїну А-1 та відповідно в контролі обміну ліпідів, незважаючи на відносну слабкість RORE-промотора цього гена у миші [Vu-Dac, ea 1997]. В результаті у таких тварин виникають недостатність антиатерогенних ліпопротеїдів високої щільності і схильність до атеросклерозу [Mamontova, ea 199? ].

Мутантні варіанти рецепторів можуть бути зручним інструментом для вивчення функцій ROR / RZR в експериментах in vitro. Так, трансфекція в проліферуючі міобласти, диференціюються в міотрубкі, мутантного RORaльфаl з делеції лігандсвязиваюшего домену, який не володіє власною трансактіваціонной активністю, призводила до зниження експресії ендогенного RORaльфаl, маркерів диференціювання MyoD, міогеніна (bHLH білка), р21 (інгібітора кінази cdk), до затримки прояви морфологічних ознак диференціювання і подальшого розвитку багатоядерних міотрубок [Lau, ea 1999], що служить важливим доказом участі RORaльфаl в диференціювання м’язової тканини. Накопичені експериментальні дані не залишають сумнівів у важливій ролі членів підродини ROR / RZR в диференціювання і регуляції функцій зрілих клітин. Відкриття мелатоніну і тіазолідиндіонів в якості лігандів цих рецепторів, здавалося б, повинно було збільшити інтерес дослідників до питань уточнення спектру функцій ROR / RZR і реалізуються через ці рецептори форм активності мелатоніну, до створення лігандів, селективних щодо окремих представників підродини та їх використанню в якості імуномодуляторів, регуляторів жирового обміну і т.д. Дивно, але буму в цих напрямках не спостерігається. Більш того, є лише поодинокі дослідження з вивчення ролі ядерних рецепторів у реалізації численних фізіологічних функцій мелатоніну в експериментах in vivo [Missbach, ea 1996, Weisenberg ea 1998]. Можливо, це частково пов’язано з подвійним типом активності ROR / RZR – конститутивним і залежним від ліганда. Для більшості дослідників ліганди – лише інструмент вивчення рецепторів, а у багатьох роботах лігандних тематика взагалі не зачіпається.

Відкриття сирітських рецепторів, ROR / RZR зокрема, з наступним виявленням лігандів є ендокринологією “навпаки”, включаючи і розподіл ролей між молекулярними біологами і ендокринологами. Відсутність швидкого прогресу в даній області можна розглядати як намечающийся структурну кризу. сиротских рецепторов, в том числе и подсемейства ROR/RZR, вновь должны быть востребованы физиологические подходы, разумеется вкупе с использованием накопленного богатейшего арсенала методов анализа активности рецепторов и в теснейшей кооперации с химиками.”>По-видимому, настає час, коли для остаточного <усиновлення> сирітських рецепторів, у тому числі і підродини ROR / RZR, знову мають бути затребувані фізіологічні підходи, зрозуміло укупі з використанням накопиченого багатющого арсеналу методів аналізу активності рецепторів і в найтіснішому кооперації з хіміками.

Comments are closed.