Рецептори: отримання в очищеному вигляді.

В даний час у вигляді очищених індивідуальних білків отримані рецептори стероїдних гормонів (прогестинів, глюкокортикоїдів і статевих гормонів) і холінергічний рецептор нікотинового типу. Успіх у виділенні холінергічного рецептора в значній мірі визначився вдалим вибором об’єкта. Було виявлено, що концентрація цих рецепторів в електричному органі ската Torpedo або вугра Electrophorus в сотні разів вище, ніж у всіх інших досліджених тканинах і об’єктах. В електричному органі тисячі мембран з’єднані паралельно в одну “батарею”, в результаті чого зміна потенціалу на кожній з мембран, що виникає під дією ацетилхоліну і становить десятки мілівольт, підсумовується і дає на “виході” потенціал, рівний кіловольт. Ці мембрани, буквально насичені холінергічними рецепторами. З 1 кг електричного органа можна виділити сотні міліграмів гомогенного препарату холінергічного рецептора. Для отримання індивідуального білка достатня очищення всього в сто разів.

Певну роль в очищенні холінергічного рецептора зіграло також застосування нейротоксинів з отрути кобри. Ці поліпептиди з молекулярною вагою в кілька тисяч дуже міцно і специфічно зв’язуються з холінергічними рецептором. Використання афінної хромотографии на колонках з нейротоксин виявилося найбільш ефективним способом очищення рецептора. Крім того, деякі нейротоксини, наприклад бунгаротоксін, зв’язуються з холінергічними рецептором дуже вибірково і практично необоротно. Після преінкубаціі неочищених фракцій електричного органу з бунгаротоксіном, міченим # 125J або # 3H, можна проводити виділення, стежачи за рецептором по пов’язаної з ним радіоактивності.

Comments are closed.