Проводка та виготовлення зрізів лімфатичних вузлів. Фарбування зрізів лімфатичних вузлів.

Для забезпечення відповідних вимог проводки, виготовлення зрізів, їх забарвлення та імуно-гістохімічних досліджень лабораторії обов’язково повинні постійно проводити контроль якості своїх реактивів та обладнання. Важливим у гематопатологіі є визначення морфологічної структури клітини, а через погані фіксації, проводки і виготовлення зрізів вона досить легко може бути перекручена і, таким чином, більш важка для розуміння.

Значний вплив на цитологічні та гістологічні характеристики надає товщина зрізів; оптимальною є товщина 3-5 мкм.
Найбільш широко використовуваною забарвленням в Гістопатологія і часто єдиною в діагностиці лімфатичних вузлів є гематоксилін і еозин (ГЕ). Забарвлення по Гимзе доповнює інші гематопатологіческіе характеристики і на більшій частині Європейського континенту є забарвленням вибору. Вона виявляє базофілів та еозинофілів, що допомагає в ідентифікації бластних клітин, плазмоцитів, еозііофілов і тучних клітин. При використанні цієї методики необхідно звертати увагу на якість забарвлення і враховувати рН реактивів; інакше може з’явитися одноманітне блідо-голубе забарвлення зрізу з малою діагностичної інформативністю.

Інформативним в гематопатологіі є і фарбування за методом ШИК. Воно виявляє включення внутрішньоядерної IgM (тільця Дотчера), базальпую мембрану і основна речовина, аналогічне такому навколо кровоносних судин в ангіоіммунобластной Т-клітинній лімфомі. Забарвлення Ретикулін може представляти цінність при визначенні обший структури лімфатичного вузла, виявленні фолікулярної ™, структури синусів і кровоносних судин.
зрізи лімфатичних вузлів

У ряді лабораторій всі описані вище забарвлення використовуються в наборі для дослідження лімфатичних вузлів в обов’язковому порядку. Проте в даний час спостерігається тенденція переходу безпосередньо від забарвлення зрізів гематоксиліном і еозином до імуногістохімічних досліджень, тоді як додаткове використання однієї чи більше забарвлень могло б мати велику діагностичну цінність.

Досвід роботи і хорошу якість гістологічних препаратів дозволяють діагностувати багато з простих лімфом вже на морфологічному рівні. Однак у практичній діяльності в більшості випадків важко віднести виявлямис зміни до якої-небудь категорії без допомоги імуногістохімічного дослідження. Навіть у біопсіях, які діагностуються з певною впевненістю морфологічно (такі як дифузна великоклітинна лімфома), імуногістохімічні дані часто дають додаткову прогностичну інформацію.

Тому в багатьох лабораторіях встановилася практика виконувати підтверджує імуногістохімічне дослідження при всіх біопсіях лімфом. Ціна цього виявляється незначною, якщо зіставити помошь в постановці точного діагнозу і вартість лікування. На жаль, в країнах, що розвиваються, де придбання і зберігання антитіл виявляється найчастіше проблематичним, а ціни чималими, імуногістохімічне дослідження з діагностичною метою практично не виконується.

У практичній діяльності до нас нерідко надходять біопсії від патологів, що поставили прийнятний морфологічний діагноз, але збентежених подальшим імуногістохімічним дослідженням. Щоб уникнути цього патології слід знати характеристики антитіл і специфічність їх реактивності. Лабораторія повинна бути предметом постійного контролю якості. Для більшості антитіл, використовуваних в гемопатологіі, в які підлягають дослідженню тканинах існують внутрішні контролі (реактивні В-і Т-клегкі, гістіоцити і т.д.).

Для антигенів, зазвичай не експрессіруемих в нормальних і реактивних тканинах, таких як анапластіческая крупноклеточная кіназа 1 (ALK-1), необхідно дослідження зовнішніх контрольних тканин. Слід бути обережними зі зрізами, які виглядають одноманітно блакитними; зазвичай це вказує на технічні недоліки.

В останнє десятиліття імуногістохімічні методи значно удосконалені в зв’язку з промисловим виготовленням великих кількостей «сильних» антитіл і розвитком методик по антигенною відновленню.

Comments are closed.