Методи дослідження в ембріології. Основи ембріонального дослідження.

Існує безліч методів дослідження, серед яких виділяються наступні: спостереження за живими зародками із застосуванням кіно-і відеозйомки (використовується в основному в експерименті). Для цього застосовується спеціальна мікрофотоустановка, що з’єднується з термокамерою, в якій розвивається зародок. При вивченні розвитку курячого ембріона, наприклад, в шкаралупі проробляєте »віконечко, яке закривається прозорою платівкою. Даний метод дозволив простежити і уточнити динаміку зміни форми і розмірів зародків в процесі розвитку.

Метод вивчення фіксованих зрізів зародків за допомогою світлової та електронної мікроскопії, гісторадіоавтографіі, гісто-і іммуноцітохіміі. Ці методи дозволяють аналізувати тканинні і внутрішньоклітинні зміни в динаміці розвитку частин зародка. За допомогою гісто-і іммуноцітохіміческіх методів досліджуються біохімічні процеси, що відбуваються в клітинах зародків, – синтез ДНК, РНК, білків, специфічних рецепторних білків і ін Із застосуванням цих методів була отримана важлива інформація про клітинної і тканинної диференціювання у розвитку ембріонів і плодів.

Метод маркування, запропонований в 1925 р. В. Фогтом (1888-1941), дозволяє вивчати переміщення клітин в розвиненому зародку. Для цього застосовуються нетоксичні для зародків маркери (наприклад, нейтральний червоний, частки деревного вугілля), а також антитіла до певних білків. При застосуванні антитіл використовується їх властивість з’єднуватися з флюоресцирующим барвником і білками зародка. За допомогою флюоресцентної мікроскопії простежується розподіл барвника і досліджується динаміка білкового синтезу в розвиваються тканинах зародка.
Методи мікрохірургії розроблялися на початку XX століття представниками школи Г. Шпемана (1869-1941). Вони включали: зняття оболонок яєць тварин, пересадку частин одного зародка іншому і ін Дані методи використовуються також для вивчення наслідків руйнування (наприклад, за допомогою лазерного променя) частин зародка або його окремих клітин. Трансплантацію як різновид мікрохірургії використовують для виявлення шляхів міграції клітин і джерел розвитку тканин. При цьому пересаджують ділянку зародка, наприклад перепела, в той же ділянку курячого зародка на місце видаленого ділянки. Ядра клітин перепела мають характерну структуру і тому відрізняються від ядер клітин зародка курки.

Експлантація – висічення невеликої ділянки зародка і вирощування його на штучному середовищі. За допомогою цього методу можна отримувати інформацію про джерела розвитку тканин з даної ділянки зародка і виявляти гістогенетичних закономірності розвитку.

Трансплантація ядер – метод, що дозволяє клонувати зародків. Наприклад, пересадка ядер з клітин епітелію кишки пуголовка шпорцевой жаби в ікринку жаби, ядро ​​якої було інактивованої ультрафіолетовим промінням, призвела до появи нових особин (досліди Гердон). Дані досліди заклали основу клонування вищих хребетних і сприяли появі (у 1997 р.) знаменитої вівці Доллі. Подібні ембріологічні експерименти переконливо показали, що ядра соматичних клітин містять повний набір генетичної інформації для розвитку нового організму.

Новітнім досягненням експериментальної ембріології є розробка методу екстракорпорального запліднення. Пересадка зародків, зачатих в пробірці, в матку становить основу лікування безпліддя. У 1973 р. Л. Шеттлз (США) витягнув предовуляторном яйцеклітину з яєчника безплідної жінки і запліднив її сперматозоїдами чоловіка. Так було покладено початок техніці пересадки зародків людини з метою лікування безпліддя. Однак тільки в 1978 р. у Великобританії в результаті успішної пересадки в матку безплідної жінки зародка людини на стадії 8 бластомерів після 2,5 доби культивування з’явився перший у світі “пробірочний” дитина масою 2700

Comments are closed.