Мембранні білки еритроцитів: методи дослідження поверхні.

Поверхня мембранних білків, звернену до цитоплазмі, можна вивчати на прикладі еритроцитів (див. плазматична мембрана еритроцитів).
Характер розташування у мембрані того чи іншого білка можна встановити двома способами.
1) Застосування реагентів, мічених флуоресцентними барвниками або несучих радіоактивну мітку. Ці реагенти не здатні проникати через мембрану і тому ковалентно зв’язуються зі специфічними групами тільки на її зовнішній стороні. Мембрани розчиняють. Білки поділяють методом електрофорезу в поліакриламідному гелі присутності ДСН, а мічені білки ідентифікують або по радіоактивності за допомогою радіоавтографії гелів, або по флоуресценціей в ультрафіолетовому світлі. Використовуючи таке спрямоване мічення, можна визначити, як конкретний білок орієнтований в мембрані: якщо він метится одночасно і на зовнішній стороні, і на цитоплазматичної стороні, то це трансмембранний білок.
2) Обробка зовнішньої або внутрішньої сторони мембрани не проникаючими через неї протеолітичними ферментами: якщо який-небудь білок частково розщеплюється в обох випадках, то він повинен бути трансмембранним.

Comments are closed.