Імуногістохімія пухлин. Маркерні білки проміжних волокон.

Електронна мікроскопія дозволила виявити в клітинах тонкі (актіноеие) волокна товщиною близько 6 їм, проміжні волокна товщиною 7-11 нм і мікротрубочки товщиною 24 нм.

Проміжні волокна беруть участь у побудові цитоскелету і є практично у всіх клітинах організму. Вони пов’язані з процесами морфогенезу, беручи участь в складних міжклітинних взаємодіях, їх значення для функції окремої клітини, очевидно, не суттєво. У проміжних волокнах виявлено 5 основних типів білків віметін, десмин, цитокератин (прекератин), білок нейрофіламентів, білок гліальних фнламентов. В клітинах мезенхімального походження проміжні волокна складаються з віметііа, в клітинах миогенного характеру – з десміну, в епітеліальних клітинах – з цітокератнна, в клітинах глії – з білка глії, в нервових клітинах – з так званих білків нейрофіламентів. З цього правила є невеликі виключення, що вимагають пояснення.

Так, клітини райдужки і кришталика, які є епітеліальними, містять проміжні волокна, побудовані з віметііа, клітини гладеньких м’язів аорти містять проміжні волокна переважно з внметіна, а не з десміну, як всі інші м’язові клітини. У деяких нейронах немає проміжних волокон. Перераховані вище типи білків проміжних волокон, утворюючи одне сімейство, в той же час чітко відрізняються один від одного за фізико-хімічними (мають різну молекулярну масу) і імунологічним свойст вам.

Моноклональні антитіла на відміну від поліклоіальних дозволяють визначати широкий діапазон білків проміжних волокон – від детермінант загальних для всіх типів білків до індивідуальних пептидів. Тому білки проміжних волокон, як справедливо підкреслює Г. А. Банников (1984), можуть служити прекрасними маркерами певного типу клітин як у дослідженнях з вивчення нормативного ембріогенезу та дефференціровкн, так н при дослідженнях патологічних процесів, зокрема, пухлинному рості.

Білки проміжних волокон клітини епітеліального походження – цитокератини – складають найбільшу групу, що включає 19 різних поліпептидів, які певним чином розподілені в епітеліальних тканинах. Цитокератини багатошарового і одношарового епітелію, кліток базаль-ного і шипуватий шарів, епітеліальні клітини різних внутрішніх органів містять різні цитокератини або їх набори, причому в одному органі може виявлятися значна гетерогенність клітин за ознакою вмісту в них цнтокератінов. Розподіл цитокератинів в різних епітеліальних клітинах строго специфічно.
імуногістохімія пухлин

Є спостереження про те, що в деяких клітинах зустрічаються два типи білків, що належать до проміжних волокнах різного тканинного походження. Десмін і віметін виявлені в мезангіальних клітинах нирки і в гладком’язових клітинах аорти. Деякі астроцити містять білок гліальних філа ментів і віметін. Перераховані винятку, з одного боку, підтверджують правило про високу специфічність білків проміжних волокон як маркерів тканинного походження клітин, з іншого – вимагають перегляду деяких, здавалося б, усталених уявлень про гістогенез окремих типів клітин.

Г. А. Банников (1984) проаналізував відомості про терміни появи білків проміжних волокон в онтогенезі. Першими на стадії пізньої морули з’являються цитокератини спочатку – цитокератини одношарових еядодермальних, потім багатошарових ектодермальних клітин. Десмін, білок гліальних і нейроіальних філа ментів в повній мірі з’являються в лостнатальном періоді. Терміни появи віметіна в онтогенезі сильно коливаються. У парієтальної ендодерми ембріона відбувається одночасна вироблення цитокератину і віметіна, у дорослих віметін з цієї тканини зникає. Клітини мезодерми синтезують віметін, численні мезенхімальні клітини, що виникли з мезодерми, продовжують синтезувати віметін в дорослому організмі, різні види м’язової тканини перемикаються в цей період онтогенезу на синтез десміну. Епітеліальні тканини, що виникли з мезодерми, наприклад бруньки, переключаються з синтезу віметіна на синтез цитокератинів. При розвитку нейронів віметін повністю замінюється білком нейральних філаментів. В гліальних клітинах також синтез віметіна заміщається синтезом білків гліальних філаментів.

Накопичення фактичного матеріалу про закономірності синтезу білків проміжних волокон в ембріогенезі вкрай важливо для розуміння цих закономірностей в пухлинних клітинах.

Імуногістохімічне вивчення за допомогою моноклональних антитіл білків проміжних волокон в пухлинних клітинах різних епітеліальних і мезенхнмальних новоутворень показало, що в них стійко зберігаються ті білки, які характерні для проміжних волокон нормальних клітин, котрі стали джерелом розвитку даної пухлини, причому цілість білків не залежить від ступеня катаплазії пухлинних клітин і зрілості новоутворення в цілому.

На клінічному матеріалі були досліджені ракові пухлини молочної залози, товстої кишки, шкіри, легенів, щитовидної залози, нирки, печінки, різні саркоми м’язового, нейрогенного, фібробластичного походження, різноманітні типи лімфосарком і т. д. У всіх випадках в пухлинних клітинах епітеліального походження виявлені різні цитокератини, в пухлинах м’язового походження – десмин, іноді в поєднанні з віметіном; в новоутвореннях гліальних походження – білок гліальних філаментів, в нейрогекних пухлинах – білки нейрофнла ментів Слід підкреслити, що в ракових пухлинах, як правило, зберігається складний набір цитокератинів, властивий проміжним волокнам гомологічних нормальних клітин 8 деяких раках пухлинні клітини містять неповний набір цитокератинів, характерних для відповідних нормальних тканин. Це явище може бути пояснено розвитком в новоутвореннях обмеженого набору типів пухлинних диференційованих клітин або обмеженою ступенем диференціювання, про що свідчать електронно-мікроскопічні дослідження.

З електронно-мікроскопічних позицій може бути пояснений до рідкісний випадок виявлення в одному новоутворенні анально-ректальної області пухлинних клітин з різними цитокератин, властивими різним епітеліальний тканин (залізисті н багатошарового плоского епітелію). При ультраструктурному дослідженні в одному і тому ж новоутворенні нерідко виявляються клітини з ознаками і плоского (тонофібрілли і т. д.), і залозистого епітелію. В електронно-мікроскопічної ідентифікації потребують і рідкісні випадки, коли в ракових пухлинах клітини містяться цитокератини, відсутні в диференційованих клітинах вихідної тканини. Як показав ультраструктурні аналіз, деякі новоутворення складаються тільки з недиференційованих клітин, які можуть містити інші цитокератини, ніж відповідні диференційовані клітини.

Comments are closed.