Білки мембранні: метод заморожування-сколювання.

Клітини заморожують при температурі рідкого азоту (-196 С) і утворився кубик льоду піддають сколюванню. Площина відколу зазвичай проходить через гідрофобну серцевину бішару будь біологічної мембрани, розділяючи його на два монослоя. Відкриваються при цьому поверхні сколів потім відтіняють платиною і вуглецем, органічна речовина видаляють і отриману в результаті платинову репліку розглядають в електронний мікроскоп.
Мембрани еритроцитів людини, оброблені у відповідності з цим методом, виявляються досить хаотично засіяними маленькими крупинками приблизно однакового розміру (близько 7,5 нм), званими внутрімембраннимі частками.
Під час заморожування-сколювання молекули білка смуги 3 не розщеплюються через те, що значна частка їх маси розташовується усередині бішару. Велика частина поліпептидного ланцюга білка смуги 3 виступає не з зовнішньої, а c цитоплазматичної сторони бішару, тому варто було б очікувати, що при використанні методу заморожування-сколювання молекули цього білка частіше будуть залишатися у внутрішній половині замороженого бішару. Це пояснило б переважну локалізацію внутрімембранних частинок на внутрішній половині мембрани еритроцитів (Р).
З іншого боку, такий білок, як глікофорін, при деформуючих міг би або розірватися або висмикнути свій короткий С-кінцевий хвіст із замороженого внутрішнього монослоя. У будь-якому випадку, виступаюча на поверхні сколу молекула глікофоріна не буде мати достатню масу, щоб виглядати як внутрімембранная частинка.
В даний час вдалося реконструювати функціонуючу систему мембранного транспорту в штучних бішару за допомогою декількох виділених транспортних білків, у тому числі і білка, що міститься в смузі 3. Всі изучавшиеся досі транспортні білки можна було побачити на відколах в електронний мікроскоп як частинки. Оскільки це в основному ті транспортні білки, які в межах бішару мають достатню масу, щоб чітко виділятися на фоні навколишніх фосфоліпідів, то, ймовірно, більшість внутрімембранних часток представляє собою білки, що виконують певні транспортні функції.

Comments are closed.