Білки мембранні: електрофорез у присутності ДСН.

Солюбілізація білків за допомогою детергентів була з великим успіхом використана для вивчення головних білків, присутніх в різних мембранах. У типовому випадку мембрани спочатку прогрівають до 1ОО С в 1%-ном розчині сильного детергенту ДСН, який руйнує все Нековалентні білок-білкові і білок-ліпідні взаємодії і повністю денатурує білки. Отриманий розчин наносять потім на поліакриламідний гель, що містить ДСН, і піддають електрофорез в сильному електричному полі протягом кількох годин. Кількість негативно зарядженого ДСН, пов’язані з білками, пропорційно масі поліпептиду, вследствии чого сумарний негативний заряд детергенту значно перевищує власний заряд білка. Тому кожний окремий білок переміщається в електричному полі зі швидкістю, яка визначається в кінцевому рахунку його молекулярною масою: чим крупніше білок, тим більшою мірою він затримується складною мережею молекул поліакриламіду, складових гель, і, отже, тим повільніше він рухається. Якщо після електрофорезу справити фарбування білків у гелі, використовуючи барвник, що зв’язується з білком, наприклад кумассі синій, то головні білки зразка можна побачити як індивідуальні смуги в гелі. Надалі для вивчення мембранних білків став застосовуватися метод двовимірного електрофорезу.

Comments are closed.