Білірубін: методи визначення.

Найчастіше вміст жовчних пігментів у сироватці визначають за допомогою реакції Ван-ден-Берга. Білірубін та його похідні взаємодіють з диазореактивом Ерліха; в результаті утворюються діазокон’югати, концентрацію яких визначають колориметрически.

За допомогою реакції Ван-ден-Берга можна відрізнити прямий білірубін від непрямого. Якщо реакцію проводять у водному середовищі, з диазореактивом Ерліха з’єднується тільки розчинну прямий білірубін (позитивна пряма реакція). При обробці метанолом відбувається розрив водневих зв’язків в молекулі непрямого білірубіну, і в реакцію вступають як прямий, так і непрямий білірубін, що дозволяє визначити їх сумарну концентрацію, тобто загальний білірубін. Рівень непрямого білірубіну визначають як різницю між концентраціями загального та прямого білірубіну. Проте результати дослідження залежать від часу, протягом якого ставиться пряма реакція. Якщо воно перевищує 1 хв, невелика частина непрямого білірубіну зв’язується з реактивом та рівень прямого білірубіну виявляється завищеним. Тому реакцію Ван-ден-Берга можна використовувати лише для приблизного визначення рівня прямого і непрямого білірубіну.

За даними більш точних методів дослідження, в нормі частка непрямого білірубіну в сироватці перевищує 96%.

Порівняльна характеристика прямого і непрямого білірубіну наведена в табл. 45.1.

Виявити білірубін у сечі можна за допомогою тест-смужок або визначення кольору піни, що утворюється при енергійному збовтуванні пробірки з сечею. У нормі піна біла, а при білірубінурія – жовта. Чим вище концентрація білірубіну в сечі, тим яскравіше колір піни; іноді жовтий відтінок буває таким слабким, що його можна помітити тільки при порівнянні з сечею здорової людини. Якщо не рахувати випадків, коли сеча концентрована, найбільш частою причиною її інтенсивно-жовтого або коричневого забарвлення є білірубінурія, хоча необхідно пам’ятати, що темний колір сечі може бути обумовлений і іншими причинами. Так, при прийомі сульфасалазину, рифампіцину та тіаміну сеча стає темно-жовтої або помаранчевої, при деяких порфіріях, гемоглобинурии, міоглобінурія і прийомі феназопірідіна – червоною, а при алкаптонуріі і меланомі – темно-коричневою або навіть чорної в результаті відкладення відповідно гомогентізіновой кислоти і меланіну .

Comments are closed.