Автоматизація цитологічних досліджень. Дослідження ДНК при цитології.

Автоматизація цитологічних досліджень може бути розділена на 2 етапи 1) – первинний відбір препаратів з наявністю патологічних змін в клітинах і виключенням «порожніх» н нормальних препаратів, 2) – діагностика, що наближається за своїм рівнем до гістологічної.

Перший етап має пряме відношення до проведення масових профілактичних оглядів. Так як при цьому до 97% препаратів, що надходять на дослідження, виявляються нормальними, то залучення великої кількості кваліфікованих фахівців-цитологів недоцільно. На 1-му етапі фактично виробляється сортування отриманих при профілактичних оглядах цитологічних препаратів на 2 групи «нормальні» і «патологічні» (з підозрою на наявність злоякісного росту).

На 2-му етапі проводиться перегляд відібраних «патологічних» препаратів лікарем-цитологом і ставиться відповідний диференційний діагноз, причому на цьому етапі передбачається використання напівавтоматичного пристрою (з введенням в нього інформації про візуально спостережуваних параметрах клітини).

Проблема автоматичного сортування цитологічних препаратів на нормальні і препарати з підозрою на злоякісний ріст не вирішена і знаходиться в стадії розробки.

Основні труднощі для автоматичного аналізу цитологічних препаратів створюють наявність скупчень клітин і нашарування їх один на одного, нерівномірне їх розташування н фарбування, наявність сторонніх включень (лейкоцити, бактерії, слнзь, кристали фарби і т. д.), складчастість цитоплазми, загини країв клітин і т. д. Труднощі тут пов’язані з відсутністю загальноприйнятих параметрів, розроблених для кожної локалізації, і почасти – з необхідністю мати ЕОМ з великою пам’яттю.
цитологія

У зв’язку з цим велике значення мають роботи цитологів-морфологів з відбору ознак, що характеризують злоякісні і доброякісні пухлини різних локалізацій. Тут також виникають великі труднощі, так як добре відомо, що злоякісні клітини не мають якихось специфічних особливостей, а отже, не існує ніяких абсолютних критеріїв злоякісності.

Здійснюються небезуспішні спроби застосування в клінічній цитології для диференціальної діагностики морфометріческнх методів. Аналіз гістограм, що відображає розподіл клітин залежно від їх площі, показав, що вони мають свої особливості при різних захворюваннях ширина підстави гістограми, висота піків, розташування останніх в певних областях гістограми, процентне співвідношення розрізняються за площею клітин.

Проведені каріометріческіе дослідження показали, що цей метод цінний не тільки в диференційній діагностиці доброякісних і злоякісних новоутворень, але і в якійсь мірі в диференціальній діагностиці різних форм останніх.

Особливе місце серед досліджень подібного роду займає кількісне визначення нуклеїнових кислот і головним чином дезоксирибонуклеїнової кислоти. В цьому напрямку до теперішнього часу вже накопичено достатній матеріал, з якого випливає, що пухлинним клітинам на відміну від нормальних соматичних клітин властива широка варіабельність вмісту ДНК і що збільшення середньої кількості ДНК на ядро ​​є характерною ознакою злоякісних пухлин. Ці показники, отже, можуть бути використані в диференційній діагностиці доброякісних і злоякісних поразок.

Дослідження вмісту ДНК в клітинах проводяться різними методами абсорбційної цітоспектрофотометріі, методом цитофлюориметрії, за допомогою радіоавтографії з використанням Н-тимідину. Однак слід зауважити, що перераховані методи досить трудомісткі, у зв’язку з чим не представляється можливим дослідження великої кількості клітинних елементів в кожному конкретному випадку. Проводиться також вивчення змісту ДНК в ядрах клітин різних новоутворень методом імпульсної цито-фотометрін.

Бурхливий розвиток хіміотерапії пухлин як одного з найважливіших напрямків сучасної онкології, синтез і виділення з природних джерел величезної кількості цитостатичних засобів вимагають точних, об’єктивних і разом з тим швидких методів дослідження, які дозволяли б чітко оцінити ступінь активності та механізм дії цих речовин з метою відбору для практичного застосування. Цитостатичні препарати, що відносяться до різних класів сполук, пошкоджують пухлинні клітини на певних стадіях їх життєвого циклу, викликаючи глибокі порушення обміну ДНК.

Застосовувані до останнього часу радіоавтографіческіе методи вивчення синтезу ДНК трудомісткі і володіють обмеженою інформативністю. Значно більші можливості для вивчення активності до механізму дії протипухлинних препаратів відкриваються при використанні методу імпульсної цитофотометрії. Він дає можливість швидко н статистично точно отримати кількісну характеристику змісту ДНК у великому числі клітинних елементів на всіх стадіях життєвого циклу і виявити анеуплоїдних клони клітин. Висока чутливість методу н відносна простота дозволяють в короткий термін провести аналіз великого числа спостережень.

Це робить його незамінним при експериментальному предклініческіх вивченні нових потенційно активних протипухлинних речовин.

Comments are closed.