АпоE: регуляторні функції.

АпоE: придушення імунітету

На поверхні лімфоцитів, моноцитів і макрофагів виявлені імуномодулюючі рецептори, здатні до взаємодії з апоЕ. Показано, що апоЕ-містять ЛП через взаємодію з цими рецепторами можуть пригнічувати клітинний імунітет [Curtiss ea 1978, Hui ea 1980, Hui ea 1980, Hui ea 1981, Keliy ea 1994, Pepe ea 1986]. АПОЄ, зв’язуючись з рецепторами, інгібує необхідні для активації лімфоцитів захоплення кальцію і метаболізм циклічних нуклеотидів. В результаті лімфоцити стають резистентними до мітогенного стимуляції.

АпоE: про механізм придушення імунітету

Взаємодія апоЕ з лімфоцитами досягало стійкого стану через 90 хв інкубації. Іммуносупрессорного активність проявлялася пізніше, приблизно через 18 год, і досягала максимуму через 24 год інкубації клітин з ізольованим апоЕ або апоЕ в складі ЛПНЩ. Ймовірно, апоЕ ініціює вторинний відповідь, для розвитку якого потрібно, щонайменше, 18 ч. Механізм даного ефекту досі незрозумілий. Відомо, що іммуносупрессорного дія не пов’язана з функціонуванням В, Е-рецептора, оскільки зазначалося як в експресують, так і в не експресують В, Е-рецептори лімфоцитах. Для прояву інгібуючого ефекту білок повинен бути доданий до клітин до мітогенного стимуляції. При додаванні після стимуляції не спостерігалося іммуносупрессорного ефекту ні у деліпідірованного апоЕ, ні у апоЕ в складі ЛПНЩ. Єдина відмінність в супресії, спричиненої ізольованим апоЕ і апоЕ в складі ЛПНЩ-частинок, полягало в тому, що для досягнення порівнянних рівнів супресії було потрібно значно більшу кількість ізольованого апоЕ, ніж цього ж білка, асоційованого з ліпідами і ЛП (2,8 мкг / мл в складі ЛПНЩ і 15 мкг / мл ізольованого апоЕ). По всій імовірності, специфічна активність апоЕ збільшується фосфоліпідами за рахунок зміни його молекулярної дисперсії. Слід зауважити, що, незважаючи на наявність даних про імуномодулюючий ефект апоЕ, механізм його ще далекий від повного з’ясування. Цілком природно виникає питання, наскільки його вплив на імунокомпетентні клітини специфічно, іншими словами, чи є апоЕ власне імунорегуляторного фактором або ж він діє на імунну систему опосередковано. Відповідь на це питання, як нам видається, був отриманий завдяки дослідженням Вогель і співробітників [Vogel ea 1994].

АпоE: інгібування проліферації

Виявилося, що рекомбінантна форма людського апоЕЗ, отримана з Є. coli, інгібувати проліферацію багатьох типів клітин, включаючи ендотеліальні і пухлинні (клітини людської меланоми, людської карциноми грудей і карциноми Капоші).

Інгібування супроводжувалося значним зниженням в клітинах синтезу ДНК. Ефект залежав від дози, часу інкубації і був оборотним. Максимальне інгібування клітинного росту спостерігали при концентрації апо, рівної 50 нМ. АПОЄ також інгібував зростання зернистих клітин ендотелію бика, клітин меланоми і карциноми людини. Автори стверджують, що апоЕ може бути ефективним модулятором ангіогенезу, злоякісного клітинного росту і метастазування. Дослідникам з університету м. Цинциннаті (США) вдалося показати, що інгібування за допомогою апоЕ проліферації мітоген-активованих Т-лімфоцитів (CD4 і CD8) супроводжувалося різким зниженням їхньої біологічної активності та синтезу цитокінів, зокрема, інтерлейкіну-2. Ефект повністю був відсутній у апоА-1 і АПОС-II [Keliy ea 1994].

У 90-х рр. отримані докази безпосередньої участі апоЕ в супресії інтерлейкін-2-залежною проліферації Т-лімфоцитів [Сiciy ea 1995].

Ділянкою, відповідальним за цитостатичний та цитотоксичний ефект апоЕ, є регіон з амфіпатіческой альфа-спіральної конформацією і амінокислотними залишками .

АпоE: вплив на макрофаги

АПОЄ здатний виявляє регулюючу дію на макрофаги. Так, екзогенний апоЕ (плазматичний або рекомбінантний) різко стимулював метаболізм ЛПДНЩ в культурі J-774 макрофагів. При цьому відзначалося збільшення зв’язування, поглинання і деградації частинок ЛПДНЩ. Специфічний ефект був опосередкований формою ЕЗ (але не Е2). Поглинання ЛПДНЩ макрофагами відбувалося за механізмом, відмінному від В, Е-рецептор-опосередкованого або “скевенджер”-шляху [Granot ea 1990]. Оскільки матрична РНК виявлена ​​в різних тканинах, включаючи печінку, легені, мозок, кишечник і м’язи, то цілком імовірно, що цей білок присутній і в макрофагах. Активація поглинання апоЕ-збагачених ЛПДНЩ макрофагами може бути пусковим механізмом трансформації макрофагів у пінисті клітини і участі останніх в утворенні атеросклеротичних бляшок.

АпоE: інгібітор ліпопротеінліпази

У дослідах in vivo та in vitro показано, що апоЕ ефективним інгібітором ліпопротеінліпази – ключового ферменту метаболізму трігліцерідбогатих ЛП [Rensen ea 1996]. Ефект апоЕ спостерігався при метилюванні лізінових залишків і повністю був відсутній при селективної модифікації аргінінових залишків 1,2-ціклогександіоном.

АпоE: вплив на функціонування мітохондрій

Інтерес викликає факт наявності на внутрішній мембрані мітохондрій гепатоцитів щурів високоаффінних місць зв’язування апоЕ [Beisiegel ea 1988]. Вивчаючи дію апоЕ на функціональні характеристики мітохондрій печінки щурів, ми виявили, що в концентрації 3 мкг на 1 мг мітохондріального білка апоЕ збільшував швидкість дихання в 3-му метаболічному стані, а в концентрації 6 мкг / мг достовірно знижував відношення АДФ / 0 при використанні глутамату в якості субстрату окислення [Panin ea 1995].

АпоE: інгібування агрегації тромбоцитів

АПОЄ у складі великих часток ЛПВЩ (щільність 1,108 г / мл) інгібував АДФ-індуковану агрегацію тромбоцитів [Riddell ea 1996]. Ефект також відтворювався апоЕ в комплексі з фосфоліпідами.

АпоE: вплив на синтез стероїдів

Регуляторні властивості апоЕ проявлялися на стероідогенной функції тека-інтерстиціальних клітин яєчників щурів [Dyer ea 1991]. Так, збагачені апоЕ щурячі ЛПВЩ надавали інгібуючий ефект на синтез і секрецію яєчниками андрогенів. ЛПВЩ, очищені від апоЕ шляхом гепарин-афінної хроматографії, інгібуючим ефектом не володіли. Ізольований, вільний від ліпідів апоЕ інгібував синтез андрогенів, у той час як очищені щурячі апоА-1 і апоА-IV цими властивостями не володіли.

 

Comments are closed.